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本生提醒您：做ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線時需要注意哪些問題
做ELISA實驗的老師們都知道ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會直接影響到實驗的結(jié)果，甚至是關(guān)系到實驗的成敗。今天小編就和大家一起來看下我們在做ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線時需要重點注意的細(xì)節(jié)問題。
設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限。而對于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度*陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。
2.檢測標(biāo)準(zhǔn)樣品時，應(yīng)按濃度遞增順序進(jìn)行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準(zhǔn)確性。
3.標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個點，但至少要保證有5個點。
4.做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎?，但一般來說，相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98，對于有些實驗，至少要0.99甚至是0.999。
5.樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出來的，所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事，否則后面的實驗結(jié)果無從談起。
6.采用倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度，這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。
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